二氧化碳濃度培養(yǎng)箱作為細胞培養(yǎng)、組織工程與生命科學研究的設備,其環(huán)境穩(wěn)定性直接決定細胞生長狀態(tài)與實驗成敗。然而,
二氧化碳濃度培養(yǎng)箱在長期運行中,受氣源波動、操作不當、維護缺失等因素影響,常出現(xiàn)CO2濃度失控、溫度異常、污染滋生等問題,輕則導致細胞生長緩慢,重則造成實驗失敗。

一、CO2濃度波動大或無法達到設定值
現(xiàn)象:顯示濃度忽高忽低,或長時間無法穩(wěn)定在5%。
原因與解決方法:
原因1:CO2氣源壓力不足或純度不夠
氣瓶余量過低(壓力<0.3MPa)或使用非高純CO2(≥99.9%)。
解決:檢查氣瓶壓力,及時更換;確保使用醫(yī)用或高純級CO2。
原因2:管路泄漏或接頭松動
連接氣瓶與培養(yǎng)箱的硅膠管老化、開裂,或接頭未擰緊。
解決:用肥皂水涂抹管路接口,觀察是否冒泡;更換老化管路,確保連接密封。
原因3:紅外傳感器污染或需校準
培養(yǎng)箱內(nèi)揮發(fā)物附著傳感器窗口,影響檢測精度。
解決:清潔傳感器窗口(按說明書操作);定期(每6–12個月)使用標準氣體進行校準。
二、溫度無法恒定或均勻性差
現(xiàn)象:箱內(nèi)溫度高于/低于設定值,或不同位置溫差大。
原因與解決方法:
原因1:門封條老化或破損
密封不嚴導致熱量散失,冷熱空氣對流。
解決:檢查門封是否變形、開裂,用酒精清潔后涂抹硅脂;嚴重時更換封條。
原因2:放置物品過多或遮擋風道
影響熱空氣循環(huán),形成“冷區(qū)”或“熱區(qū)”。
解決:合理擺放培養(yǎng)瓶/皿,確保箱內(nèi)氣流暢通,不遮擋風機與出風口。
原因3:溫度傳感器故障
傳感器漂移或損壞。
解決:使用標準溫度計多點驗證,必要時聯(lián)系廠家更換。
三、濕度偏低,培養(yǎng)液蒸發(fā)快
現(xiàn)象:水盤干涸,培養(yǎng)基體積減少,滲透壓升高。
原因與解決方法:
原因1:水盤缺水
蒸發(fā)或未及時添加。
解決:每日檢查水位,使用無菌蒸餾水或去離子水補充至刻度線。
原因2:開門頻繁或時間過長
濕潤空氣逸出,干燥空氣進入。
解決:縮短開門時間,預熱移液器等工具,減少箱內(nèi)操作時間。
原因3:HEPA過濾器堵塞
影響空氣循環(huán),降低加濕效率。
解決:定期更換HEPA過濾器(通常每年一次)。
四、箱內(nèi)污染(細菌、霉菌、支原體)
現(xiàn)象:培養(yǎng)液渾濁、pH異常、鏡下見微生物。
原因與解決方法:
原因1:未定期清潔消毒
水盤、內(nèi)壁滋生微生物。
解決:每周用70%酒精擦拭內(nèi)腔;每月執(zhí)行高溫濕熱滅菌(如140℃,4小時)或紫外照射。
原因2:操作不規(guī)范引入污染
手、工具或培養(yǎng)基未嚴格無菌。
解決:加強無菌操作培訓,使用生物安全柜操作。
原因3:水盤使用自來水
自來水含礦物質(zhì)與微生物,易滋生藻類。
解決:必須使用無菌蒸餾水或去離子水。